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Fluorophore selection guide for flow cytometry

4 Flow Cytometry Fluorophore selection guide Dyes for the 488 nm laser, continued RPE-Alexa Fluor® 700 → Fluorochrome of choice for BD™ FACSCalibur™ instrument

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Les ddNTP sont maitenant couplés à des fluorochromes. Une seule réaction PCR est utilisée. Chaque ddNTP a un fluorochrome différent. B. Les RFLP (Rrestriction Fragment Lenght Polymorphism). Cette technique permet de détecter une mutation qui crée ou abolit un site de restriction et qui est associée à une pathologie. 1.

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The brightness of fluorochromes is directly proportional to the extinction coefficient, a measurement of the fluorophore’s probability of absorbing a photon of light. For example, a dim fluorochrome, such as DyLightTM 350, has ε value = 15,000, whereas a brighter member of this family, DyLightTM 650, has an ε value = 250,000.

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Fluorochromes that are conjugated to a larger macromolecule (such as a nucleic acid, lipid, enzyme, or protein) through adsorption or covalent bonds are termed fluorophores. In general, fluorophores are divided into two broad classes, termed intrinsic and extrinsic. Intrinsic fluorophores, such as

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ddNTP sont incorporés, marqués par 4 fluorochromes différents. Les fragments d’ADN obtenus sont de longueurs différentes ; le séquenceur sépare les fragments d’ADN selon leur taille par chromatographie. Les systèmes actuels détectent la florescence des 4 nucléotides à partir de la même colonne. Le résultat est

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fluorochromes . • La révélation par fluorescence permet de savoir si les fragments d’ADN déposés se sont ou non hybridés avec les sondes de la puce , et donc si telle ou telle . 1. 2.

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