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Técnicas de Biología Molecular - depa.fquim.unam.mx
T cnicas de Biolog a Molecular I. Enzimas de restricci n An lisis DNA Las enzimas de restricci n fueron aisladas de bacterias; su funci n natural es proteger contra DNA extra o II. Separaci n electrofor tica de mol culas de DNA (A) Geles de secuenciaci n (separaci n de bandas con 1 nt de diferencia) (B) electroforesis para RFLP (sepraci n entre 100 a 10000 nt) (C) electroforesis de campo pulsante (separaci n de DNA cromosomal) + + + III. Secuenciaci n de DNA por el m todo de Sanger No acepta elongaci n de la cadena de nucleotidos por la DNA polimerasa dsDNA molde ( secuencia?) 4 desoxiribonucle tidos (dNTPs) cebador de DNA DNA polimerasa 5 5 3 3 Secuenciaci n automatizada de DNA Marcaje de un fragmento de DNA (obtenci n de una sonda) dCTP[ P32] Hibridaci n y reconocimiento de secuencias con alta homolog a 65oC 50oC IV.
II. Separación electroforética de moléculas de DNA (A) Geles de secuenciación (separación de bandas con 1 nt de diferencia) (B) Electroforesis para RFLP (sepración entre 100 a 10000 nt) (C) Electroforesis de campo pulsante (separación de …
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