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Analyse du GHB dans l’urine et le sang de …

Analyse du GHB dans l'urine et le sang de personnes vivantes et de personnes d c d es, en vue de la d finition de l'intervalle des valeurs physiologiques chez les personnes vivantes et l' valuation du d lai post-mortem. Avril 2008. Annette JORDAN, Ecole Sup rieure de la Sant , Lausanne. Responsables: Dr Marc AUGSBURGER. Dr Frank SPORKERT. Mme Catherine MEYLAN BOHNENBLUST. Unit de toxicologie et de chimie forensique, Centre Universitaire Romand de M decine L gale, Site de Lausanne. 1 Sommaire Le GHB est une mol cule endog ne, produite par le corps, et galement une drogue de synth se. Sa nature endog ne engendre des probl mes d'interpr tation. Y a-t-il eu r ellement une absobtion ? Le dosage du GHB se fait par une extraction suivie d'une d rivatisation par MSTFSA puis par Analyse par GCMS. Cette tude comporte trois grandes parties.

Analyse du GHB dans l’urine et le sang de personnes vivantes et de personnes décédées, en vue de la définition de l’intervalle des …

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1 Analyse du GHB dans l'urine et le sang de personnes vivantes et de personnes d c d es, en vue de la d finition de l'intervalle des valeurs physiologiques chez les personnes vivantes et l' valuation du d lai post-mortem. Avril 2008. Annette JORDAN, Ecole Sup rieure de la Sant , Lausanne. Responsables: Dr Marc AUGSBURGER. Dr Frank SPORKERT. Mme Catherine MEYLAN BOHNENBLUST. Unit de toxicologie et de chimie forensique, Centre Universitaire Romand de M decine L gale, Site de Lausanne. 1 Sommaire Le GHB est une mol cule endog ne, produite par le corps, et galement une drogue de synth se. Sa nature endog ne engendre des probl mes d'interpr tation. Y a-t-il eu r ellement une absobtion ? Le dosage du GHB se fait par une extraction suivie d'une d rivatisation par MSTFSA puis par Analyse par GCMS. Cette tude comporte trois grandes parties.

2 Une partie traite de la stabilit du GHB sanguin. Un pr l vement sanguin est effectu sur six personnes puis est analys diff rents intervalles jusqu' 70 jours. Les tubes sont conserv s . temp rature ambiante, au r frig rateur et au cong lateur pour d terminer l'influence du mode de conservation. La d finition des valeurs de r f rences du GHB endog ne est utile lors de l'interpr tation des r sultats. Du sang et de l'urine d'une m me personne (40 cas de routine du laboratoire) et 34. urines du LAD sont dos s pour conna tre les valeurs normales de personnes n'ayant priori pas consomm de GHB. Pour 42 cas d'autopsies, du sang et de l'urine d'une m me personne n'ayant a priori pas consomm de GHB sont dos dans le but d' valuer le d lai post-mortem. 2 Abstract GHB is an endogenous molecule, synthesized by the body, and a synthesis drug too.

3 Its endogenous nature causes interpretative problems. Is there a real absorbtion of GHB ? The detection of GHB is done by an extraction than a derivatization and finaly analyzed by GCMS. This study contains three parts. One speak about GHB stability in blood. A blood sample is taken on six persons and analyzed at differents times until 70 days. The blood is kept at room temperature, at fridge and at freezer to specify the conservation influence on GHB value. The reference values of endogenous GHB is used to results interpretation. Blood and urine of a same person (40 cases of laboratory routine) and 34 urines from LAD were analyzed to know values of persons who have not taken GHB in principle. For 42 cases of autopsy, blood and urine from a same person who have not taken GHB in principle was analyzed. The target is to evalue the post mortem period.

4 Page 2 de 48. 3 Table des mati res 1 Sommaire .. 2. 2 2. 3 Table des mati res .. 3. 3 6. D 6. Statistiques .. 6. Historique .. 6. Synonymes .. 7. GHB de synth 7. Mol cule de 7. Mol cule de GBL .. 7. Biosynth 8. Pharmacocin tique .. 9. 9. Th 9. Soumission chimique .. 10. 10. Mode d'action .. 10. Dopage .. 10. 4 Buts du travail .. 11. Techniques d' analyses du GHB .. 11. Valeurs de r f rences .. 12. Ante-mortem .. 12. Post-mortem .. 13. 5 Mat riel .. 14. Page 3 de 48. Mat riel biologique .. 14. Stabilit (Cv) .. 14. Personnes vivantes (V).. 14. Autopsies (A) .. 15. Num 15. Instruments, mat riel, solutions et r 15. Instruments .. 15. Mat riel .. 17. Solutions et r actifs .. 18. 6 M 20. Pr paration .. 20. Standard 20. Droite d' talonnage .. 20. 21. Extraction .. 21. D rivatisation .. 21. Marche suivre .. 22. La chromatographie gazeuse et la spectrom trie de masse : aspects g n raux.

5 22. Utilisation des 24. Nettoyage de l'appareil .. 24. Contr le du bon 24. S quence d'injection .. 24. Diff rences entre les deux appareils .. 25. M 25. Laine de 25. Traitement du r sultat :.. 25. Doubles pics .. 26. Page 4 de 48. Droite de 27. 7 R sultats .. 28. Stabilit (Cv) .. 28. R sum du 28. R sultats .. 28. Discussion .. 33. Personnes vivantes (V) .. 34. R sum du 34. R sultats .. 35. Discussion .. 37. Autopsies (A).. 38. R sum du 38. R sultats .. 38. Discussion .. 39. Discussion g n rale sur la m thode .. 40. 8 41. 9 Lexique .. 43. 10 Lexique des abr viations .. 45. 11 R f rences bibliographiques .. 46. 12 Annexes .. 48. Les mots surlign s en gras dans ce travail sont d finis dans le lexique. Page 5 de 48. 3 Introduction D finition L'acide gamma-hydroxybutirique ou GHB est une substance de synth se mais aussi endog ne.

6 On le retrouve naturellement dans la plupart des tissus chez les mammif res. Le GHB agit comme neurotransmetteur et neuromodulateur. Il tait utilis en m decine comme agent anesth sique et hypnotique depuis les ann es 60. (Ferrara, Frison, Tedeschi & Le Beau, 2001, ). Il est actuellement utilis en Suisse pour le traitement de la cataplexie dans les cas de narcolepsie. La substance est un stup fiant (Compendium suisse des m dicaments 2007). Selon Ghysel (1999), il (GHB) est galement utilis des fins non m dicales chez des individus pratiquant le culturisme, chez des adeptes de produits psychoactifs. Il a galement t utilis des fins criminelles pour soumettre des individus (p. 129). Statistiques Entre 1997 et 2005, le CSIT (Centre Suisse d'Information toxicologique) a enregistr 334 cas d'intoxication par du GHB dont un cas mortel.

7 Pour 271 d'entre eux, il s'agissait d'une intoxication aigu cons cutive une absorption volontaire de GHB et pour 28, d'une intoxication aigu non intentionnelle. 23 cas concernaient une exposition chronique. (Office f d ral de la sant public, 2007). Historique En 1874, Alexandre Saytzeff a d crit la pr paration de ces sels (Ghysel, 1999, ). En 1961, il fut synth tis pour la premi re fois par le professeur Henri Laborit. Dans les ann es 60, le GHB a commenc tre utilis comme agent anesth sique et hypnotique (Ferrara, Frison, Tedeschi & Le Beau, 2001, ). Au d but des ann es 80, il est utilis par les bodybuilders aux USA pour ses effets anabolisants. Dans la fin des ann es 80, il est consomm comme drogue ecstasy liquide . Les effets sont semblables l'alcool ou aux benzodiaz pines. (Andresen, 2008.). En 2002, le GHB est soumis la l gislation sur les stup fiants.

8 En 2005, le GHB est utilis en Suisse comme m dicament. Page 6 de 48. Synonymes Le GHB est plus couramment connu sous le nom de la drogue du violeur . Il est aussi connu sous le nom d'ecstasy liquide. Ferrara, Frison, Tedeschi & Le Beau, (2001) recensent une vingtaine de noms de rue streets names (p. 108). Le nom de la mol cule utilis par le Compendium suisse des m dicaments est l'oxybate de sodium, il est commercialis sous le nom de Xyrem . GHB de synth se Mol cule de GHB. Formule brute : C4H8O3. Poids mol culaire : 104. Point d' bullition : 178- 180 C. GHB. Le sel sodique du GHB est synth tis partir de gamma-butyrolactone (GBL) et d'hydroxide de sodium (NaOH). Son sel de sodium C4H7 NaO3. Poids mol culaire Mol cule de GBL. Formule : C4H6O2. Poids mol culaire : Point de fusion: -43 -45 C. Point d' bullition: 204 206 C.

9 Page 7 de 48. GBL. La diff rence entre le GHB et le GBL est que le GBL a perdu une mol cule d'eau. Le NaOH s'appelle aussi soude caustique et le GBL se trouve dans des d capants pour peintures. Ces deux produits sont en vente dans le commerce. Sur internet, la recette pour la synth se en laboratoire se trouve facilement ainsi que la recette simple effectuer dans sa cuisine. La synth se s'effectue ais ment. Le GHB est donc accessible tous et n'est pas cher. Biosynth se La substance endog ne est produite dans le cerveau partir de l'acide gamma-aminobutyrique (GABA). Le GABA est catabolis par une acide gamma-amminobutyrique transaminase en semi-ald hyde succinique (SAS). Le SAS est oxyd en succinate par une semi-ald hyde succinique d shydrog nase. Une faible part du SAS est r duite en GHB. (Ghysel, 1999, ). GABA transaminase GABA SAS.

10 SAS d shydrog nase SAS Succinate R duction Succinate GHB. Page 8 de 48. Pharmacocin tique L'absorption est rapide mais incompl te apr s une prise orale. Elle est retard e apr s un repas riche en graisses. La biodisponibilit est de 25 %. Moins de 1% est li aux prot ines plasmatiques. Le GHB a une demi-vie de 1 heure. Son Analyse doit tre effectu e rapidement apr s la prise. Le GHB est catabolis soit par une -oxydation en 4-hydroxycrotonine, soit par oxydation d'une GHB d shydog nase en SAS qui est m tabolis en acide succinique par la d sydrog nase semi-ald hyde succinique. L'acide succinique entre dans le cycle de Krebs o . il est m tabolis en gaz carbonique et en eau. Le GHB peut aussi tre d grad en SAS par une transhydrog nase en pr sence d'alpha-c toglutarate. Il existe une autre voie qui fait intervenir une -oxydation et du 3,4-hydroxybutyrate pour arriver la formation d'ac tyl CoA.


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