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1 Institut f r Hygiene und ffentliche Gesundheit der Universit t BonnWirksame Desinfektionsverfahren gegen Sporen von Clostridium difficileRibotyp 027J. Gebel1, S. B ttgen1, O. Koch1, S. Engelhart1, B. Hornei1,2, F. Pitten3,M. Exner11: Institut f r Hygiene und ffentliche Gesundheit der Universit t, Bonn2: ber rtliche Gemeinschaftspraxis f r Labormedizin, K ln3: Institut f r Krankenhaushygiene und Infektionspr vention (IKI), GiessenInstitut f r Hygiene und ffentliche Gesundheit der Universit t BonnGliederung Methodik Ergebnisse: Instrumentendesinfektionsmittel Fl chendesinfektionsmittel ZusammenfassungInstitut f r Hygiene und ffentliche Gesundheit der Universit t BonnTestorganismen: Clostridium difficileSporenArt StammStoffwechselC.

3 Institut für Hygiene und Öffentliche Gesundheit der Universität Bonn Fläche Konz. Wirkstoffkonz. Wirkstoffbasis Produkt 10 * 1 % */ 3 % 4.500 ppm */13.500 ppm

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1 1 Institut f r Hygiene und ffentliche Gesundheit der Universit t BonnWirksame Desinfektionsverfahren gegen Sporen von Clostridium difficileRibotyp 027J. Gebel1, S. B ttgen1, O. Koch1, S. Engelhart1, B. Hornei1,2, F. Pitten3,M. Exner11: Institut f r Hygiene und ffentliche Gesundheit der Universit t, Bonn2: ber rtliche Gemeinschaftspraxis f r Labormedizin, K ln3: Institut f r Krankenhaushygiene und Infektionspr vention (IKI), GiessenInstitut f r Hygiene und ffentliche Gesundheit der Universit t BonnGliederung Methodik Ergebnisse: Instrumentendesinfektionsmittel Fl chendesinfektionsmittel ZusammenfassungInstitut f r Hygiene und ffentliche Gesundheit der Universit t BonnTestorganismen: Clostridium difficileSporenArt StammStoffwechselC.

2 DifficileATCC 9689 / DSM 1296 AnaerobierC. difficilePCR-Ribotyp 027(Hyperendemiestamm) Kuijper, Leiden University Medical CentreMethoden: Modif. DGHM 2001(Kapitel 14)Fl chePhase 2, Stufe 2 PhaseAnwendungMethodePhase 2, Stufe 1 Instrumente/ Fl chemodif. DGHM 2001(Kapitel 9)Phase 2, Stufe 2 Instrumentemodif. DGHM 2001(Kapitel 15)Phase 2, Stufe 3 Fl chePraxistest Fl che-Boden(SOP 119)Institut f r Hygiene und ffentliche Gesundheit der Universit t BonnSporenanreicherung: Clostridium difficile Fleischbouillonmit je einer Kolonie einer Reinkultur animpfen Inkubation anaerob; 37 C; 24 h Columbia-Agarplatten 24 h vorreduzieren Vorreduzierte Agarplatten mit je 0,1 ml aus der Fleischbouillon-Kultur beimpfen Inkubation anaerob; 37 C; 7 d Inkubation anaerob; RT; 14 d Sporengewinnung durch Abschwemmen der N hrb den mit 0,067 M Phosphatpuffer Zentrifugation: 4000 rpm, 10 min Hitzeinaktivierung veg.

3 Zellen: 80 C, 10 min Bestimmung der germinationsf higen Sporen mittels Plattengu verfahren+ 10 g/ml Lysozym ( units/mg) Ausbeute: 20 - 40 ml Sporensuspension (~ 106 Sporen/ml)Institut f r Hygiene und ffentliche Gesundheit der Universit t BonnInstitut f r Hygiene und ffentliche Gesundheit der Universit t BonnClostridium difficileSporen:Endosporenf rbung nach WirtzPhasenkontrast-Aufnahme: 400-fachDifferential Interference Contrast (DIC): 1000-fachSporen des PCR- Ribotyps 0272 Institut f r Hygiene und ffentliche Gesundheit der Universit t BonnClostridium difficileSporen:REM-Aufnahmen PCR- Ribotyps 027 Institut f r Hygiene und ffentliche Gesundheit der Universit t BonnInstrumenten- und Fl chendesinfektionmittelAldehyde + AldabspalterProdukt 3 *Produkt 2 *PeroxidverbindungenProdukt 1 *WirkstoffbasisInstrumenten-desinfektion s-mittelPerv.

4 + org. S ureProdukt 14 *PeroxidverbindungenProdukt 15 Aldehyde + QuatsProdukt 5 AldehydeProdukt 4 *Produkt 11 *PeroxidverbindungenProdukt 10 *Produkt 8 ChlorverbindungenProdukt 7 Produkt 6 *Produkt 12 *ChloramideProdukt 9 Produkt 13 *WirkstoffbasisFl chendes-infektionsmittel- Sporizid deklarierte Produkte *- Einwirkzeit: Herstellerangaben- Konzentration: Herstellerangaben- Belastung: - worst case (hohe Belastung)- 0,3 % Albumin +0,3 % SchafbluterythrocytenWichtige Informationen:Institut f r Hygiene und ffentliche Gesundheit der Universit t Bonn15 min1 %Glutaraldehyd (pH: 6,59)Peressigs ure (pH: 3,47)Standard (QS)0,1 % minEinwirkzeitPhase 2-Stufe 1 und Phase 2-Stufe 2 Vergleich Laborstamm ATCC 9689mit Ribotyp 027 Institut f r Hygiene und ffentliche Gesundheit der Universit t Bonn6 %1,62 %2 % ppmPera Safe *Gigasept FF *Sekusept aktiv * ppm + + AldehydabspalterWirkstoffbasisInstrument e.

5 Phase 2-Stufe 1 und Phase 2-Stufe 2 Institut f r Hygiene und ffentliche Gesundheit der Universit t BonnInstrumentendesinfektionsmittel- Wirksamkeit gegen Ribotyp 027 -1,62 % - 10 minAldehyde + AldehydabspalterPeroxid-verbindungenWirk stoffbasis6 % - 6 h2 % - 15 Relationneues Gutachten1,62 % - 10 minSporen ( )2 % - 30 minSporen ( )DeklarationGigasept FF(neu) *Pera Safe *Sekuspt aktiv *Instrumente WirksamkeitWirksamkeit:Auf europ ischer Ebene wird derzeit eine Reduktion der Sporen um mindestens3 log10-Stufengefordert (siehe DIN EN 13704).Institut f r Hygiene und ffentliche Gesundheit der Universit t BonnFl che: Phase 2-Stufe 1 (quant. Suspensionsversuche) ppm3 %Produkt 4 *Aldehyde + ppm + ppm7,5 %Pursept FD *4,1% / 1,8 %2 % ppm + ppmProdukt 5 Actichlor Plus */ 8 Fl f r Hygiene und ffentliche Gesundheit der Universit t ppm * ppm1 % */ 3 %Produkt 10 *Peroxidv.

6 + org. S ppm + ppm2,5 %Produkt 14 *> ppm2 % */ Acti.* ppm1 %Produkt 11 *2,5 % Produkt 9 ppmChloramideFl che:Phase 2-Stufe 1 (quant. Suspensionsversuche)Institut f r Hygiene und ffentliche Gesundheit der Universit t BonnFl chendesinfektion: Ergebnisse nach Phase 2-Stufe 115 % - 4 h Peroxidv. + organ. S urenPeroxid-verbindungenChloramideChlora bspalt. VerbindungenAldehyde + QuatsAldehydeWirkstoffbasis1 % - 2 h *1 % - 2 h (Sporen EN 13697, o. Belastung)7,5 % - 8 h7,5 % - 8 hbakterielle % - hSporizid ( )2 % - 1 hSporizid ( )2 % - 5 minSporizid ( )1 % - 4 hSporizid ( ) t15 % - 4 hbakterielle Sporen-3 % - 4 hSporen (C. sporogenes)Deklaration 4,1 % - 15 minActichlor Plus*Pursept FD * 2 % - 1 hProdukt 5 3 % - 4 hProdukt 4 * 3 % - 4 hProdukt 10 * 2,5 % - 2 hProdukt 91,8 % - 15 minProdukt 82 % - 15 minActiclens *2 % - 15 minIncidinactive*1 % - 4 hProdukt 11 *Produkt 14 *Instrumente2,5 % - 1 Relation Wirksam-keitInstitut f r Hygiene und ffentliche Gesundheit der Universit t Bonn Schematische Darstellung der Wischstrecke - 4 Felder-Verfahren:Erm glicht praxisrelevante Aussage ber - Reduktion der Testorganismen - Streuungsrisiko von MikroorganismenPraxistest Fl che.

7 4-Felder-Testnach Laborstandard (SOP 119)Institut f r Hygiene und ffentliche Gesundheit der Universit t BonnPraxistest Fl che: 4-Felder-Testnach Laborstandard (SOP 119)012 34561234 FieldFactorsRCAFRF to maxInstitut f r Hygiene und ffentliche Gesundheit der Universit t Bonn 0,860,355,71 Aldehyde + Quats7,5 % - 8 hPursept FD * Wirksamkeit3,4500,351,600,7200,44AF2,743 ,37 Wasser standardisierte H rte (WSH)Kontrolle2,664,04 Peroxidverbindungen3 % - 4 hProdukt 10 *Peroxidverbindungen1 % - 30 minPeroxidverbindungen1 % - 30 minChlorabspaltende Verb. 1,8 % - 30 minChlorabspaltende Verb. 4,1 % - 30 minAldehyde + Quats15 % - 4 hWirkstoffbasis00,591,700,700RC5,47 Acticlens *5,54 Incidin active *4,52 Produkt 85,27 Actichlor Plus6,15 RFFl cheErgebnisse: 4-Felder-Test (nur wirksame Produkte nach P2-S1-Test)Zu erf llende Kriterien:- RF > 3 log Einheiten - AF < 0,5 log Einheiten RF = Reduktion RC = Restkontamination AF = AkkumulationInstitut f r Hygiene und ffentliche Gesundheit der Universit t BonnSpezielles Desinfektionsverfahren:Oberfl chendesinfektion mit einem H2O2-Aerosolin Kooperation mit dem IKI-Gie en (PD Dr.)

8 Pitten)4 Institut f r Hygiene und ffentliche Gesundheit der Universit t BonnOberfl chendesinfektion mit einem H2O2-AerosolPeroxidverbindungen7,5% H2O20,0075% SilberKonzentratSanosil S015 * :Fa. Infection Control, NLMethodik:modif. DGHM 2001 (Kap. 14; mit OP-Fliesen)Aerosol-Zugabe:Erh hung der relativen Luftfeuchte von ~ 50% auf ~90%Belastung:geringe Belastung (0,03% Albumin)Neutralisation: 0,1% Katalase ( U/ml)Institut f r Hygiene und ffentliche Gesundheit der Universit t BonnOberfl chendesinfektion mit einem H2O2-AerosolDas H2O2-Aerosol f hrte zur vollst ndigen Reduktionvon (Ribotyp 027)Institut f r Hygiene und ffentliche Gesundheit der Universit t BonnZusammenfassung Ribotyp 027 deutlich resistenter als Laborstamm ATCC 9689 es gibt Produkte im Markt, die als sporizid deklariert sind, aber unter den gegebenen Pr fbedingungen nichtausreichend wirksam gegen ber Ribotyp 027 sindUnabh ngige berpr fung dieser Angaben evtl.

9 Durch VAH zu empfehlen!Institut f r Hygiene und ffentliche Gesundheit der Universit t BonnWirksame Desinfektionsmittel gegen Sporen von 027 (hohe org. Belastung):Gigasept FF (neu)6% - 6hAldehyd + AldehydabspalterPera Safe1,62% - 10 minPeroxidverbindungenSekusept aktiv2% - 30 minPeroxidverbindungenInstrumenteActichl or Plus4,1% - 15 minChlorabspaltende FD15% - 4hAldehyde + QuatsActiclens1% - 30 minPeroxidverbindungenIncidin active1% - 30 minPeroxidverbindungenFl cheZusammenfassungInstitut f r Hygiene und ffentliche Gesundheit der Universit t BonnNeues Desinfektionsverfahren: H2O2-Aerosol hochinteressante Anwendungsm glichkeit vollst ndige Reduktion der Ribotyp 027 im gesamten Raum (geringe org.)

10 Belastung) m glicherweise eine potentielle Alternative zu Formaldehyd Nachteile: Konditionierung der relativen Raumluftfeuchtigkeit erforderlich(ggf. Senkung der relativen Raumluftfeuchte n tig)ZusammenfassungInstitut f r Hygiene und ffentliche Gesundheit der Universit t BonnUnser Dank gilt: Herrn PD Dr. Pitten (IKI, Gie en) den Mitarbeiterinnen des Labors (DMT, Uni Bonn):S. BiebersdorfB. BorsbachS. Koch


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