Guía práctica - Asociación Bioquímica de Mendoza

1 Gu a pr cticaPor: M. en C. Vicente de M ria y Campos la estandarizaci n delprocesamiento y examen delas muestras de der Mundial en Control de CalidadBio-Rad LaboratoriosEl Uroan lisis es una parte integral de los ex menes rutinarios entodo Laboratorio Cl nico. Su utilidad en la obtenci n de importanteinformaci n como el diagn stico de enfermedades de los ri onesy el tracto urinario, el h gado, desordenes metab licos, as como elmonitoreo de la efectividad en el tratamiento de problemas cr nicosy en la investigaci n de condiciones asintom ticas, son capacidadesy caracter sticas que le dan un valor incalculable en el cuidado dela satisfacer tales objetivos requiere del cumplimento de doscondiciones generales:a) La adecuada obtenci n de una muestra, proveniente de un pacientecon una indicaci n m dica bien dirigida para la realizaci n delexamen. Las indicaciones para la realizaci n del Uroan lisis son lassiguientes: Sospecha o seguimiento de s ntomas que sugieran infecci n deltracto urinario Sospecha o seguimiento de enfermedad renal no infecciosa, primaria o secundaria a enfermedad cr nica (reum tica, hipertensi n, toxemia por embarazo, efectos adversos a medicamentos) Sospecha o seguimiento de enfermedad post-renal no infecciosa Detecci n de glucosuria Seguimiento de pacientes con diabetes Detecci n o seguimiento de estados metab licos como: v mito o diarrea, acidosis/ alcalosis, cetosis o litiasisb) Un Uroan lisis con procedimientos estandarizados y bien Norma Internacional ISO- 15189 IMNC-2006 que incluye losRequisitos Particulares para la Calidad y la Competencia de losLaboratorios Cl nicos, indispensable para la Acreditaci n delLaboratorio en la Rep blica Mexicana, enuncia en suintroducci n.

2 Los servicios del Laboratorio Cl nico sonesenciales para la atenci n al paciente y por tanto debenestar disponibles para cumplir con las necesidades detodos los pacientes y el personal cl nico responsable dela salud humana. Esto incluye requisici n, preparaci n delpaciente, recolecci n de muestras, identificaci n, transporte,almacenamiento, procesamiento y examen de muestrascl nicas con la subsiguiente validaci n, interpretaci n einforme, as como la seguridad y la tica del trabajo del laboratorio .El objetivo del presente documento es el de proporcionar una gu apr ctica para la estandarizaci n del procesamiento y examen de lasmuestras de orina, en donde la experiencia en el rea anal tica, deense anza y de evaluaci n externa de la calidad me han demostradouna necesidad de atenci n especial en el Uroan n2 Desde hace mucho tiempo se reconoce que las propiedades f sicasy qu micas de la orina constituyen indicadores importantes delestado de salud, ya que fue el primer l quido biol gico que se utiliz con fines de diagn la utilizaci n de hormigas para la detecci n de glucosuriahasta la automatizaci n del examen incluyendo el an lisis de part culaspor citometr a de flujo y la identificaci n microsc pica por an lisisde im genes, fueron muchos los m dicos que hicieron aportacionessignificativas al estudio sistematizado de la orina.

3 Algunos de losm s importantes se mencionan a continuaci n:Siglo VIII. El m dico Te filo Protospharius escribe un tratado dondese se ala que la orina deriva de la sangre y sugiere que mediantesu color se puede diagnosticar el estado de salud del organismo ytambi n diferentes enfermedades de rganos XI. En Persia, Ismael de Jurgani escribe un estudio pr cticoen el que incluye siete observaciones o pruebas a realizar en laorina, como son color, consistencia, cantidad, transparencia,sedimento, olor y XVI. Paracelso (1494-1541) se ala que adem s de examinarla orina con los sentidos, hay que hacer cosas con ella y ver lo quepasa. A ade vinagre y observa que en algunas, precipita unasustancia que no sabe interpretar pero que sabemos que sonprote 1674, Thomas Willis en Inglaterra publica un tratado en el queintenta realizar un verdadero an lisis qu mico de la orina de acuerdocon los conocimientos de su XIX.

4 En 1827 Richard Bright considera por primera vez en unestudio de laboratorio, la detecci n de alb mina en orina comoverdadero signo f sico de enfermedad. En 1850, Jules Maumen es el padre de las tiras reactivas si se tiene en cuenta que para esa poca impregn una tira de lana de oveja con cloruro de esta o lacual al aplicar una gota de orina y calent ndola con una vela, la tirase tornaba negra inmediatamente si la orina conten a az XX. En 1947, las compa as de seguros comienzan a incorporarel examen General de Orina a sus ex menes m dicos, lo queincrementa enormemente el n mero de ex menes realizados. En1941 Walter Ames Compton desarrolla una tableta reactiva paradeterminar az cares reductores en orina de forma mucho m s r piday simple que la prueba de Benedict que se utilizaba hasta 1950, la compa a Boehringer Mannheim fabric las tirillasreactivas por vez primera a nivel industrial.

5 Actualmente la tecnolog apermite determinar 10 analitos de manera simultanea con una solatira reactiva en dos AEl Laboratorio Cl nico como un rea de la salud,fundamental en la llamada medicina basada enevidencias exige profundas bases cient ficas parala comprensi n de los factores que afectan losprocesos para la obtenci n de resultados y lainterpretaci n de las desviaciones cuando no seconfirma una sospecha diagn stica (o las cosas nosalen como se esperaba). Las bases te ricas seadquieren en intensos a os de preparaci nacad mica, pero trat ndose de un rea deinvestigaci n cl nica eminentemente pr ctica, elprofesional del laboratorio culmina su preparaci ny se perfecciona en el campo de trabajo. Esta partese puede cursar por diferentes caminos, dentro delos cuales la capacitaci n continua y los estudiosde postgrado son la ruta mas directa y segura paraadquirir experiencia, incluso en un corto tiempo, yaque experiencia es un concepto activo, tanto f sicacomo mentalmente, buscando respuestas en lainvestigaci n y promoviendo la evoluci n de laprofesi camino para reforzar el conocimiento te ricoes por la tradici n oral, llena de mitolog a que setransmite en apasionantes narracionesacompa adas de un caf caliente, reunidos alrededorde la llama de un mechero, donde la falta deinformaci n actual puede convencer al analista deborrar los cilindros del resultado de una muestrapor no presentar prote nas en la medici n con tirareactiva.

6 Este y otros mitos acompa an a la pr cticadel uroan lisis y aunque, como cualquier mito,pueden haber tenido una base de realidad en elpasado, los que se refieren al m todo de trabajodeben ser revisados para lograr resultadosreproducibles y con un valor cl mica Urinaria. La herramienta por excelencia enel uroan lisis es la Tira Reactiva para el examenqu mico. Con sus inicios en 1850 y un ampliodesarrollo en la segunda mitad del siglo XX hastasu comercializaci n en la d cada de 1950, es elavance de la tecnolog a que dio el impulso inicial ala posibilidad de analizar un elevado n mero demuestras de orina en un corto tiempo. Su facilidadde uso, alta sensibilidad y especificidad, y la rapidezcon al que se obtienen resultados semicuantitativosHistoria3 Los sistemas destinados al an lisis qu mico de la orina se dividen entres categor as: Equipos para medici n individual. Solamente se introduce una tirareactiva en cada ciclo de lectura.

7 La tira se coloca en un canalestrecho, con dimensiones exactas para albergar una tira. Se da unase al de inicio y la tira es introducida al fot metro para su lectura conun adecuado control del tiempo de reacci n. A continuaci n se deberetirar la tira manualmente. Presenta ventajas significativas sobre lalectura visual de la tira reactiva, pero se debe tener en cuenta unadecuado manejo, ya que el disparo del cron metro que mide elFig 1de 10 par metros, da importante informaci n sobre el metabolismo decarbohidratos, funci n hep tica y renal, balance cido-base e infeccionesde las v as mejores resultados que se pueden obtener con las tiras reactivasrequieren una serie de condiciones que se deben controlar y quedependen en su mayor a del desempe o del analista y son las masimportantes: Diferentes condiciones de alumbrado en el sitio de trabajo Capacidad de discernimiento de colores interindividual por los diferentes analistas Una intensa coloraci n propia de la orina Cansancio y disminuci n de la capacidad de concentrarse en grandes series de muestras Exactitud en la medici n del tiempo de reacci n para la lectura de la tiraPor estas razones se ha desarrollado la siguiente herramienta que hamejorado significativamente el an lisis qu mico de la orina, los equiposlectores de tiras reactivas.

8 Son fot metros de reflexi n en los que seemite un haz de luz de determinada longitud de onda dirigido a cadauna de las zonas reactivas de la tira, se mide la luz reflejada, se procesay se convierte en un resultado de concentraci n por un procesador, Fig. 1tiempo de reacci n depende del analista. Otrocuidado primordial para el funcionamiento deeste tipo de equipo es la limpieza del canal deintroducci n de la tira, ya que por susdimensiones facilita el arrastre entre muestras. Sistemas de an lisis semiautom ticos. Seintroducen las tiras manualmente pero en formacontinua en intervalos breves. El transporte, lamedici n y eliminaci n de las tiras se realizanautom ticamente. Los resultados de la medici nson memorizados y producidosautom ticamente. Este nivel de equipo mejorael riesgo de arrastre que presenta el nivel anteriory acelera el proceso. Sistemas de an lisis totalmente este tipo de sistema se introduce una al cuotade la muestra de orina en un tubo de ensayo enun dispositivo de posici n ( rack ).

9 Elreconocimiento de la muestra, la inmersi n dela tira en la orina, la incubaci n, conducci n ylectura de la tira son completamenteautomatizadas. Un sistema de medici n conestas caracter sticas estandariza todo el procesodel examen qu mico con la tira reactiva ysolamente requiere de los cuidados comunes acualquier sistema automatizado con que secuente en el laboratorio y deben consultarse enel manual de operaci n del la utilizaci n manual de la tira reactiva hastala sistematizaci n con un analizador automatizadodeben vigilarse mediante un sistema de Controlde Calidad que permita evaluar tanto lareproducibilidad como la exactitud de losresultados, en lo que prestaremos especial atenci nen un cap tulo posterior, ya que la aparente sencillezen el uso de las tiras reactivas y los equiposlectores, los hace susceptibles de la presentaci nde errores aleatorios y sistem ticos que requierendemostrarse para corregirse y lisis Microsc pico.

10 La herramienta mas sencillay la primera que apareci en el mercado es elsistema Kova para estandarizaci n de la cuentamicrosc pica de part culas en el sedimento un equipo de material pl stico desechable yestandarizado para controlar el volumen en el tubo,resuspender el sedimento en un volumen fijo ycontar las part culas microsc picas en una c marade cuenta estandarizada (se describe con detallemas adelante).Mas recientemente la automatizaci n ha alcanzadoal an lisis microsc pico de la orina desarrollandoequipos para la cuenta e identificaci n de part culasmicrosc picas con dos tecnolog as:4 Elimine el resto en la taza del ba o Tape el frasco evitando tocar el interior y entregarlo en el laboratorio lo antes posiblePara paciente femenino: Lave sus manos con agua y jab n antes de obtener la muestra Separe sus labios Limpie sus genitales externos, de adelante haciaatr s, con tres toallas h medas Seque con una toalla seca Deje salir un primer chorro a la taza del ba o Deposite la siguiente porci n en el frasco Elimine el resto en la taza del ba o Tape el frasco evitando tocar el interior y entregarlo en el laboratorio lo antes posibleM TODO DE RECOLECCI NOrina Espont nea.