PROGRAMME D’ARÉDITATION DES LAORATOIRES …

1 Centre d'expertise en analyse environnementale du Qu bec PROGRAMME d'accr ditation des laboratoires d'analyse protocole POUR LA VALIDATION. D'UNE M THODE D'ANALYSE EN CHIMIE. DR-12-VMC. dition : 6 mars 2015. Pour toute information compl mentaire sur les activit s du Centre d'expertise en analyse environnementale du Qu bec ou pour vous procurer nos documents, veuillez consulter notre site Internet l'adresse suivante : ou communiquer avec nous : Centre d'expertise en analyse environnementale du Qu bec Complexe scientifique 2700, rue Einstein, bureau E-2-220. Qu bec (Qu bec) G1P 3W8. T l phone : 418 643-1301. T l copieur : 418 528-1091. Courriel : R f rence bibliographique : CENTRE D'EXPERTISE EN ANALYSE ENVIRONNEMENTALE DU QU BEC. protocole pour la validation d'une m thode d'analyse en chimie, DR-12-VMC, Qu bec, Minist re du D veloppement durable, de l'Environnement et de la Lutte contre les changements climatiques, 2015, 29 p.

2 D p t l gal Biblioth que et Archives nationales du Qu bec, 2015. ISBN 978-2-550-72697-5 (PDF). ISBN 978-2-550-56172-9 (PDF) dition pr c dente Gouvernement du Qu bec, 2015. Avant-propos Le Centre d'expertise en analyse environnementale du Qu bec (ci-apr s appel Centre d'expertise ) administre le PROGRAMME d'accr ditation des laboratoires d'analyse (PALA). Le minist re de l'Agriculture, des P cheries et de l'Alimentation du Qu bec appuie le Centre d'expertise pour le volet technique du secteur agricole. Ce PROGRAMME , bas sur la norme internationale ISO/CEI 17025, touche un grand nombre de laboratoires uvrant dans le domaine de l'analyse environnementale ou agricole. Le protocole pour la validation d'une m thode d'analyse en chimie s'inscrit dans la s rie de documents de r f rence produits par le Centre d'expertise en analyse environnementale du Qu bec, responsable de la gestion du PALA.

3 Il pr cise les exigences li es la validation des m thodes d'analyse en chimie. DR-12-VMC Page 3 de 29. TABLE DES MATI RES. AVANT-PROPOS ..3. 1 LIMITE DE D TECTION D'UNE M THODE (LDM) ..9. Estimation de la limite de d tection d'une m thode (LDM)..9. tablissement de la limite de d tection d'une m thode (LDM)..10. Sur une courte p riode l'aide d' chantillons .. 10. Sur une longue p riode l'aide de 11. M thode de calcul de la limite de d tection d'une m thode (LDM).. 11. M thode de calcul du ratio de conformit (R) ..12. Interpr tation de la valeur du ratio de conformit (R) .. 12. 2 LIMITE DE QUANTIFICATION D'UNE M THODE (LQM) ..13. 3 LIMITE DE LIN ARIT (LL) ..13. 4 FID LIT ..13. R plicabilit ..14. R p tabilit ..14. Reproductibilit ..14. M thode de calcul de la r plicabilit , la r p tabilit et la reproductibilit ..15. 5 M thode de calcul de la justesse ..16. 6 SENSIBILIT.

4 16. M thode de calcul de la sensibilit ..16. 7 POURCENTAGE DE R CUP DR-12-VMC Page 5 de 29. M thode de calcul de la r cup ration ..18. GLOSSAIRE ..19. BIBLIOGRAPHIE ..21. ANNEXE I - ANNEXE II - REPR SENTATION GRAPHIQUE DE LA VALIDATION D'UNE. M ANNEXE III - CALCUL DE LA LIMITE DE D TECTION D'UNE M ANNEXE IV - VALEUR DU T DE STUDENT POUR UN INTERVALLE BILAT RAL . UN SEUIL DE CONFIANCE 95 % ..29. Page 6 de 29 DR-12-VMC. INTRODUCTION. Ce document d finit les termes et le processus relatifs la fiabilit et la validation d'une m thode d'analyse. Il existe plusieurs d finitions et fa ons de calculer les diff rents param tres li s la validation d'une m thode. l'int rieur du suivi de la qualit des activit s de laboratoire, il devient essentiel d'uniformiser ces d finitions ainsi que les m thodes de calcul utilis es. La validation d'une m thode d'analyse entra ne la d termination de plusieurs param tres : la limite de d tection d'une m thode (LDM), la limite de quantification d'une m thode (LQM), la limite de lin arit (LL), la fid lit (r plicabilit , r p tabilit , reproductibilit ), la justesse, la sensibilit , et finalement, la r cup ration.

5 L'annexe I illustre les formules de calcul qui sont utilis es pour la d termination des diff rents param tres et l'annexe II les repr sente graphiquement. Quelques param tres de la validation peuvent ne pas s'appliquer certaines m thodes. DR-12-VMC Page 7 de 29. 1 LIMITE DE D TECTION D'UNE M THODE (LDM). La limite de d tection d'une m thode est la plus basse concentration pour un compos . analys dans une matrice r elle qui, lorsqu'il subit toutes les tapes d'une m thode compl te, incluant les extractions chimiques et le pr traitement, produit un signal d tectable avec une fiabilit d finie statistiquement diff rent de celui produit par un blanc dans les m mes conditions. La d termination de la LDM s'effectue selon les tapes suivantes : l'estimation de la LDM;. l' tablissement de la LDM;. l' valuation du ratio de conformit . Estimation de la limite de d tection d'une m thode (LDM).

6 L'estimation de la LDM s'effectue selon l'une des fa ons suivantes : 1) la concentration indiqu e dans la litt rature pour une m thode quivalente;. 2) la concentration correspondante un rapport signal/bruit de 3:1 dans la matrice appropri e;. 3) la concentration quivalente 3 fois l' cart type d'un talon bas niveau dans un solvant appropri ;. 4) la concentration correspondante la limite instrumentale de d tection (LID). La LID est la plus basse concentration d'un compos analys dans l'eau pure ou dans un solvant appropri sans la pr sence de matrice qu'un instrument analytique puisse d tecter avec une fiabilit d finie. Cette fiabilit est statistiquement diff rente de la r ponse du bruit de fond obtenu par l'instrument. La limite instrumentale de d tection est tablie par l'addition du compos analys dans l'eau pure ou dans le solvant appropri (solution talon) de fa on obtenir une concentration finale du compos analys correspondant environ 5 fois la LID estim e.

7 Cette solution est introduite directement dans le syst me instrumental pour l'analyse. Par la suite, l' cart type est calcul sur les 10 replica et la LID gale 3 fois l' cart type. DR-12-VMC Page 9 de 29. tablissement de la limite de d tection d'une m thode (LDM). Il existe deux fa ons de calculer la LDM : 1) sur une courte p riode l'aide d' chantillons;. 2) sur une longue p riode l'aide de duplicata. Sur une courte p riode l'aide d' chantillons partir de la limite de d tection estim e (LDMestim e), proc der aux tapes suivantes : Analyser un chantillon r el Calculer la concentration LDMestim e 5 < conc. < 7 . Conc. < 5 LDMestim e Conc. > 7 LDMestim e LDMestim e Faire un ajout ou Diluer ou s lectionner un s lectionner un autre Analyser 10 replica 1 et 1 blanc 2. autre chantillon chantillon Calculer la moyenne des blancs 2. Calculer chaque r sultat 3 en soustrayant la moyenne des blancs.

8 1 Pour certains param tres en chimie organique, il faut utiliser 10 chantillons identiques puisque l'analyse requiert quelquefois tout l' chantillon (exemple : huiles et graisses). 2 Si le blanc de m thode est n cessaire pour calculer la concentration du compos d'int r t, utiliser alors le m me nombre de blancs que de replica. 3 Si un ou des r sultats diff rent grandement des autres valeurs, effectuer un test statistique de rejet reconnu de fa on liminer les valeurs aberrantes. Reprendre les analyses de fa on obtenir 10 r sultats valides. Page 10 de 29 DR-12-VMC. partir des r sultats obtenus, calculer : Moyenne arithm tique cart type des replica des replica n x n i =1. i (x x i )2. x= s (n ) =. i =1. n n 1. o x : moyenne arithm tique d'une s rie de mesures;. xi : mesures individuelles;. n : nombre de mesures;. s : cart type d'une s rie de mesures. Sur une longue p riode l'aide de duplicata Utiliser les r sultats d'analyse des duplicata journaliers pour l'ann e en cours.

9 La concen- tration des duplicata, dans une matrice enrichie ou une matrice naturelle selon le besoin, doit tre entre 5 et 7 fois la limite de d tection estim e. partir des diff rences entre duplicata, (40 paires au minimum doivent tre utilis es). calculer la variance (s2) et l' cart type s : Variance cart type s 2. =. d 2. s = s2. 2K. o d : diff rence entre les paires de duplicata;. K : nombre de paires de duplicata;. s : cart type des duplicata. M thode de calcul de la limite de d tection d'une m thode (LDM). LDM = 3 s o LDM : limite de d tection de la m thode;. s : cart type des replica. Note : Lors de l'analyse d' chantillons, la LDM report e doit tenir compte du facteur de dilution et de tous les chiffres significatifs appropri s. DR-12-VMC Page 11 de 29. M thode de calcul du ratio de conformit (R). Le calcul du ratio de conformit nous permet de d terminer la validit d'une d marche pour l' tablissement d'une limite de d tection.

10 En g n ral, si le r sultat du calcul pour un ratio R. qui sert l' tablissement d'une limite de d tection n'est pas sup rieur 4, il faut recommencer la proc dure d' tablissement de la limite de d tection avec un chantillon qui a une concentration plus haute. x x R= =. LDM calcul e 3s o R : ratio de conformit ;. x : moyenne arithm tique des n replica;. s : cart type des n replica;. LDM : limite de d tection de la m thode. Interpr tation de la valeur du ratio de conformit (R). Si 4 < R < 10, la concentration utilis e est ad quate. Si R < 4, ce ratio indique que la limite r elle de d tection de la m thode est plus lev e que la limite de d tection estim e lors des essais. Reprendre les essais en r visant la limite de d tection estim e et la concentration de l' chantillon utilis . Si R >10, Ce ratio indique que la limite r elle de d tection de la m thode est plus basse que la limite de d tection estim e lors des essais.