September 2014 Diagnostic Update - idexx.ch

1 Diagnostic UpdateMehr Sicherheit bei der Diagnose der Felinen Infekti sen peritonitis Es gibt zwei bekannte Biotypen des Felinen Coronavirus, die Katzen infizieren und unterschiedliche biologische Folgen haben: das Feline Enterale Coronavirus (FECV) und das Feline Infekti se peritonitis -virus (FIPV). Der FIP Virus RealPCR Test unterscheidet zwischen dem geringer virulenten bzw. weniger pathogenen FECV-Biotyp und dem virulenten bzw. pathogenen FIPV-Biotyp und erm glicht so eine sicherere Diagnose der Felinen Infekti sen peritonitis (FIP). Die Diagnose der FIP kann schwierig und frustrierend sein. Der nun zur Verf gung stehende neue Test hilft Ihnen, eine gesicherte Diagnose zu stellen, damit die Katzenbesitzer hinsichtlich der Behandlung ihrer Tiere eine fundierte Entscheidung treffen und sich gegebenenfalls auf den endg ltigen Ausgang der Krankheit vorbereiten k 2014 HintergrundDie Feline Infekti se peritonitis ist eine durch das FIP-Virus, eine hoch virulente Form des Felinen Coronavirus, verursachte, t dlich verlaufende Infektion und gekennzeichnet durch eine immunvermittelte pyogranulomat se Vaskulitis.

2 Die FIP kommt weltweit vor und betrifft vorwiegend junge Katzen im Alter von weniger als zwei Jahren. Dennoch k nnen alle Katzen an der Infektion erkranken, wobei f r einige Rassen ein h heres Risiko zu bestehen scheint. Stress, vorangegangene opera-tive Eingriffe oder die Haltung in grossen Katzenpopulationen stellen zus tzliche Risikofaktoren Die Erkrankung kann in der exsudativen ( feuchten ) oder in der nicht exsudativen ( trockenen ) Form die Diagnose der FIP eine Herausforderung darstelltDie klinischen Symptome der FIP k nnen denen vieler anderer systemischer Erkrankungen hneln. Bislang gab es keinen spezifischen diagnostischen Test, mit dem eine Unterschei-dung zwischen dem weniger virulenten FECV-Biotyp und dem t dlichen FIPV-Biotyp des felinen Coronavirus m glich gewe-sen w re. Die Diagnose der FIP erfolgte bisher in der Regel auf der Basis von Anamnese, klinischen Symptomen, Labor-befunden und entsprechenden Coronavirus-Antik rpertitern.

3 Eine definitive Diagnose erforderte eine Biopsie einschliesslich Immunhistochemie (IHC). Die Bestimmung der Coronavirus-Antik rpertiter ist f r die Diagnose der FIP allerdings von begrenztem Nutzen, da je nach Region etwa 25 % der Katzen in Einzelhaltung und 75 90 % der Tiere in Mehrkatzenhaus-halten Antik rper gegen das Coronavirus aufweisen. Allerdings entwickeln nur 7,8 12 % der mit dem felinen Coronavirus infizierten Katzen tats chlich eine Feline Infekti se ,3 IDEXX hatte bereits vor einiger Zeit den FCoV RealPCR Test auf den Markt gebracht, der das Feline Coronavirus (FCoV) in Geweben und K rperfl ssigkeiten nachweist, aber nicht zwischen dem gering bzw. nicht virulenten FECV-Biotyp und dem t dlichen FIPV-Biotyp unterscheidet. Ein positiver FCoV RealPCR Test anhand von Exsudat- oder Gewebeproben verst rkte daher zwar den Verdacht auf FIP, reichte jedoch nicht zur Best tigung der Diagnose. Da somit weiterhin ein kla-rer Bedarf nach einem zuverl ssigen diagnostischen Test f r FIP bestand, wurde der FIP Virus RealPCR Test FIP Virus RealPCR Test2012 haben Forscher in den Niederlanden bei Katzen, die mit dem FIP-Virus infiziert waren, zwei Mutationen im Spike (S)-Gen des felinen Coronavirus identifiziert, die bei Katzen mit einer FECV-Infektion nicht nachweisbar Bei Coro- naviren ist das S-Protein am Zelleintritt beteiligt und f r die Rezeptorbindung und die Fusion mit der Membran der Ziel- zelle verantwortlich.

4 Laut Aussage der Wissenschaftler bef - higen diese Virulenzmutationen das FIP-Virus dazu, Makro-phagen effizient zu infizieren, sich in ihnen zu vermehren und dadurch systemisch zu verbreiten, w hrend sich die Replika-tion des FECV prim r auf die Darmepithelzellen beschr Auf der Grundlage dieser Erkenntnisse hat die Abteilung f r Molekulare Diagnostik von IDEXX in Zusammenarbeit mit den Forschern der Universit t Utrecht den FIP Virus RealPCR Test entwickelt und validiert. Dieser Test ist in der Lage, jede der Mutationen einzeln Diavet bietet ab sofort den FIP Virus RealPCR Test an, der die Diagnose der felinen infekti sen peritonitis der FIP Virus RealPCR Test durchgef hrt werden sollteDer FIP Virus RealPCR Test stellt ein zus tzliches diagnosti-sches Werkzeug dar, das zur Best tigung der Diagnose einer FIP bei Katzen mit klinischen Symptomen und entsprechenden Laborbefunden herangezogen werden kann (siehe Diagnose der FIP ).

5 Der FIP Virus RealPCR Test sollte bei Katzen mit Verdacht auf eine feuchte FIP anhand von Peritoneal- oder Pleuralfl ssigkeitsproben und bei Katzen mit Verdacht auf eine trockene FIP anhand von Biopsien oder Aspiraten durchge-f hrt werden. Die Durchf hrung des Tests mit EDTA-Blut wird nicht empfohlen, da die Viruskonzentration im Blut oft zu gering ist, um eine Biotypisierung zu erlauben. Kot wird als Probenmaterial f r die Biotypisierung nicht akzeptiert, da im Kot normalerweise nur der FECV-Biotyp nachweisbar ist und dieses Ergebnis keine Aussage ber eine Erkrankung der Katze zul sst. Interpretation der Ergebnisse Alle Proben werden zun chst mit dem FCoV RealPCR Test auf das Vorliegen des Felinen Coronavirus getestet. F llt dieser Test positiv aus, f hren wir unmittelbar anschliessend den neuen FIP Virus RealPCR Test durch. Wie in nachste- hender Tabelle aufgef hrt, gibt es vier m gliche Ergebnisse f r den InterpretationFIPV Das FCoV ist zum Felinen Infekti sen Peritonitisvirus (FIPV)-Biotyp mutiert.

6 Bei Katzen mit klinischen Symptomen unterst tzt dieses Ergebnis die Diagnose einer FIP. Sollten dagegen typische klinische Symptome fehlen, zeigt der Nachweis des FIPV-Biotyps auf, dass die untersuchte Katze ein hohes Risiko besitzt, eine FIP zu entwickeln. Die Katze sollte deshalb engmaschig kontrolliert Das FCoV ist nicht zum Felinen Infekti sen Peritonitisvirus (FIPV)-Biotyp mutiert. Es ist unwahrscheinlich, dass die Katze an einer FIP erkrankt nicht bestimmbarDurch unbekannte Stammvarianten konnten die nachgewiesenen FCoV nicht typisiert werden. Eine FIP kann nicht ausgeschlossen der Nachweis-grenzeDurch die geringe Konzentration der nachgewiesenen FCoV war eine Biotypisierung nicht m glich. Eine FIP kann nicht ausgeschlossen Ph nomen tritt h ufig bei der Analyse von Blutproben auf, kann aber auch bei anderen Unter- suchungsmaterialien vorkommen. Wir empfehlen die Einsendung einer alternativen Probe (z.)

7 B. Aszites- oder Pleurafl ssigkeit, Liquor, Gewebe oder Aspirat).Diagnostische Genauigkeit Die diagnostische Genauigkeit des FIP Virus RealPCR Tests wurde anhand von 186 Katzen ermittelt, von denen einige gesund waren und andere an einer durch Biopsie best tigten FIP litten. Bei 164 Katzen war eine Biotypisierung m glich. Die diagnostische Sensitivit t betrug 98,7 % (bei einer FIP-kranken Katze wurde der FECV-Biotyp ermittelt). Die diagnostische Spezifit t betrug 100 % (bei keiner der gesunden Katzen wurde ein FIPV-Biotyp diagnostiziert). Die Gesamtgenauigkeit des Tests betrug 99,4 %. Bei 6 Katzen (3,2 %) konnte auf-grund des Vorliegens eines unbekannten Virusstammes kein Biotypisierungsergebnis erhalten werden. Bei 16 Proben (8,6 %) war die Viruslast sehr gering, sodass die Interpretation der Testergebnisse Unterhalb der Nachweisgrenze an das ProbenmaterialZu den f r die FIPV-Biotypisierung empfohlenen Probenma-terialien z hlen Peritoneal- und Pleuralfl ssigkeit oder Liquor bzw.

8 Gewebeaspirat oder Biopsien. EDTA-Blutproben werden akzeptiert, enthalten jedoch in der Regel unzureichende Mengen an viralen Partikeln f r eine Biotypisierung kann nicht mit Kotproben durchgef hrt werden. BearbeitungsdauerErgebnisse k nnen 2 3 Arbeitstage nach Eingang der Proben im Labor erwartet werden. Literaturnachweis1. Hsieh B, Burney D. Feline Infectious peritonitis . Clinician s Brief 2014; Rohrbach BW, Legendre AM, Baldwin CA, et al. Epidemiology of feline infectious peritonitis among cats examined at veterinary medical teaching hospitals. JAVMA 2001; 218 Addie D, Bel k S, Boucraut-Baralon C, et al. Feline infectious perito-nitis. ABCD guidelines on prevention and management. J Feline Med Surg 2009; 11 Chang H, Egberink HF, Halpin R, Spiro DJ, Rottier PJM. Spike protein fusion peptide and feline coronavirus virulence. Emerg Infect Dis 2012; 18:1089-1095. Analyse der Abdominalfl ssigkeit: Gemischtzelliges Exsudat Protein: 6,5 g/dl; 65 g/l Kernhaltige Zellen: l Mikroskopischer Befund: Die Probe enth lt vorwiegend Neutrophile, eine geringere Anzahl an Makrophagen und gelegentlich Lymphozyten.

9 Zu finden sind m gliche intrazellul re Strukturen, die Bakterien darstellen k nnten, eventuell aber auch Zelltr mmer. Die genaue klinische Relevanz ist ungewiss. Eine FIP sollte in Betracht gezogen werden, m glicherweise auch eine septische peritonitis . Zu erw gen sind eine Kultur inkl. Sensitivit tsbestimmung; allerdings ist die Zellzahl relativ gering f r ein septisches durch den Experten f r Innere Medizin bei IDEXX: Signalement und Allgemeinuntersuchung sprechen f r eine FIP. Ver nderungen bei den Laborwerten nicht zwingend diagnostisch; z. B. keine Hyperglobulin mie, normaler Albumin/Globulin-Quotient (aber verd chtig bei 0,6), keine An mie; die Fl ssigkeitsanalyse spricht f r eine FIP, ist aber nicht beweisend. Empfohlen wird die Durchf hrung des FIP Virus RealPCR Tests aus dem Aszites. Ist der Test positiv f r den FIPV-Biotyp, liegt sehr wahrscheinlich eine FIP vor. Bei positivem Test f r den FECV-Biotyp ist das Vorliegen einer FIP des FIP Virus RealPCR Tests: FIPV Der FIPV-Biotyp weist auf eine erfolgte Mutation des FCoV zum FIPV-Biotyp hin.

10 Bei Katzen mit klinischen Symp-tomen st tzt dies die Diagnose Verlauf: Felix wurde symptomatisch mit unterst tzender Therapie behandelt, doch verschlechterte sich sein Zustand rasch nach Diagnosestellung. Der Kater wurde zwei Wochen sp ter euthanasiert. Eine Sektion wurde durchgef hrt, und Gewebeproben verschiedener Organe wurden untersucht. Der mikroskopische Befund ergab eine hochgradige generalisierte fibrin s-eitrige peritonitis mit einer f r FIP typischen fokalen Pleuritis. Durch immunhistochemische F rbung wurde das Coronavirus-Antigen in den Entz ndungsherden identifiziert, was die Diagnose FIP best des FIP Virus RealPCR Tests: Felix zeigte bei der Allgemeinuntersuchung und beim Laborbefund zwar einige Auff lligkeiten, welche die Diag-nose FIP st tzten, doch sprachen wie bei vielen Katzen mit dieser Krankheit zahlreiche andere Befunde nicht eindeutig f r diese Diagnose. Dank des FIP Virus RealPCR Tests konnten sowohl der Tierarzt als auch der Besitzer von Felix sicher sein, dass es sich um FIP handelte.