POSTULADOS DE KOCH D O S D E K O C H - Unesp

1 1 POSTULADOS DE KOCHProf. Margarete DiagnoseMorte s bita dos citrosFerrugem do determina o de um agente causal de doen as feita atrav s de certos procedimentos POSTULADOS de KochDiagnose sintomasPesquisas e estudosNovas doen as - ?Crit rios propostos por HenleRobert Koch (1880) bact ria: agente causal docarb nculo POSTULADOSDEKOCHR obert Koch (1843-1910)(m dico alem o)Koch e sua equipe:-desenvolvimento da microbiologia-meios de cultura (Batata, gar)-vidrarias (placas de Petri)-Bact ria (carb nculo - antrax)-Bact ria da tuberculose-vibri o da c leraPOSTULADOSDEKOCHPOSTULADOS DE KOCH1. O microrganismo deve estar sempre presente nasles es das plantas doentes (ASSOCIA O CONSTANTE);2.

2 O microrganismo deve ser isolado e cultivado em CULTURA PURA;3. O microrganismo isolado, deve REPRODUZIR OS SINTOMAS quando inoculado em uma planta sadia;4. O microrganismo deve ser REISOLADO da planta inoculada artificialmente e corresponder, em todas as suas caracter sticas, com o isolado das les ASSOCIA O CONSTANTE (sintoma/microrganismo) Observa es de sintomas e sinais Descri es de doen as em publica es espec ficas Observa es ao microsc pio estereosc pico emicrosc pio ticoDiagnose: Sintomas bem conhecidos facilitam a identifica oExemplo: ferrugens, o dios, carv Ferrugem do cafeeiro(Hemileia vastatrix)Ferrugem da goiabeira(Puccinia psidii)Ferrugem do trigo(Puccinia graminis f.)

3 Sp. tritici) ured sporosCarv o comum do milho(Ustilago maydis)CARV o da cana-de-a ucar(Ustilago scitaminea) Carv o do trigo(Ustilago tritici)POSTULADOSDEKOCHO DIOSO dio do trigo(Erysiphe tritici) O dio das cucurbit ceas(Sphaerotheca fuliginea) O dio da roseira(Sphaerotheca fuliginea) con dioconidi foroPOSTULADOSDEKOCHB ipolaris maydis(Helminthosporium maydis)Exserohilum turcicum(Helminthosporium)Bipolaris zeicola(Helminthosporium carbonum)MANCHAS FOLIARESPOSTULADOSDEKOCHPEPINO - Antracnose Colletotrichum orbicularePOSTULADOSDEKOCHPEPINO mancha angularPseudomonas syringaepv. TESTE DE EXSUDA O o bacteriana do tecido de plantacom sintomas de bacteriosePOSTULADOSDEKOCH3 NOVAS DOEN ASCana-de-a ucar: ferrugensCitrus: cvc; morte s bita; greening; Soja: ferrugemBananeira: sigatoka negraPOSTULADOSDEKOCHPOSTULADOS DE KOCH 1.

4 O microrganismo deve estar sempre presente nasles es das plantas doentes (ASSOCIA O CONSTANTE);2. O microrganismo deve ser isolado e cultivado em CULTURA PURA;POSTULADOSDEKOCH2. Isolamento do microrganismo (cultura pura)*meio de cultura Batata-dextrose- gar (BDA)Maltose-peptona- gar (MPA) gar- guaNutriente gar (bact rias)outros (seletivos)*t cnica de isolamento - Direto- Fragmentos de tecidos- Maceramento de tecidos (bact rias)POSTULADOSDEKOCHP odrid o negra das br ssicas(Xanthomonas campestrispv. campestrisXanthomonas DE BACT de bact rias fitopatog nicasPOSTULADOSDEKOCHI solamento de bact rias a partir de tecido foliar (REZENDE et al., 2011). DE BACT RIASPOSTULADOSDEKOCH4 Isolamento de bact riasCultura com contamina o de fungosCultura pura sem col nias isoladasCultura puraPOSTULADOSDEKOCHcol nia isoladaPOSTULADOSDEKOCHI solamento de fungosM TODO: direto (estruturas vis veis)Meio de cultura Esporangi sporos(Rhizopussp.))

5 Escler dio:Sclerotium rolfsiiM TODO: fragmentos de tecido (REZENDE et al., 2011)POSTULADOSDEKOCHI solamento de fungosplanta infectadaPin a esterilizadausada para transferirfragmentosFragmentos das margensde les es colocada emsolu o de cloro 10%Fragmentos de tecido colocados em papel toalha esterilizado para remover o excesso de cloroFragmentos colocadosem placas de Petri(nutriente- gar)Fragmentos colocadosem meio de cultura,emdiferentes tempode imers o na solu ode cloroUma cultura pura do pat geno obtida por repicagem de um segmentodo pat geno desenvolvido em placaanterior para uma nova placa com omeio de culturaNo tempo de imers o correta(90segundos)

6 Apenasopat geno sobrevive no centrodo fragmento e desenvolve-sefora do tecidoM TODO: fragmentos de tecido (AGRIOS, 2005)POSTULADOSDEKOCHI solamento de fungosResultado do isolamento de fungo fitopatog nico de tecidode planta infectada (AGRIOS, 2005).POSTULADOSDEKOCH cultura puraIsolamento de fungosM TODO: Fragmentos de tecidosAssepsia lcool(30 segundos)hipoclorito 1% (at 1 minuto)Meio de (Helminthosporium sp.)Cultura pura - BDAPOSTULADOSDEKOCH5 RESTRI ES AO SEGUNDO POSTULADOP arasitas obrigat rios (biotr ficos)M ldiosO diosFerrugensCarv esVirosesAgentes causais das doen as POSTULADOSDEKOCHPOSTULADOS DE KOCH 1. O microrganismo deve estar sempre presente nasles es das plantas doentes (ASSOCIA O CONSTANTE); 2.

7 O microrganismo deve ser isolado e cultivado emCULTURA PURA;3. O microrganismo isolado, deve REPRODUZIR OS SINTOMAS quando inoculado em uma planta sadia;POSTULADOSDEKOCH3. Inocula o em hospedeiro sadio (Reprodu o dos sintomas)m todos- pulveriza o de in culo (esporos, bact rias)- ferimentos (riscas com agulhas ou palitos) - imers o em in culo-inocula o por inje o-contamina o do solo-uso de vetoresPOSTULADOSDEKOCHE xemplo: T cnica de inocula o com asc sporos liberados gar com pseudot cioscaixas de propaga oPOSTULADOSDEKOCHP lanta infectada com v rusFolhas jovens infectadasEm alguns casos, plantas inoculadas devem ser lavadas com gua logo ap sa inocula oSeiva infectada aplicada em plantas sadias com os dedos, gaze, bast o de vidro ou pincelCotil dones, folhas prim rias ou folhas regulares s o pulverizadas com abrasivoLes es locais aparecem de 2 a 21 diasFiltragem da seiva infectadaFolhas em tamp o maceradas com pistilo Folhas infectadas e gua ou tamp o em almofazrizSeiva infectada usada parainocula o com dedos, gaze, bast o de vidro.

8 PincelSeiva infectadaPlantas inoculadas s ocolocadas em casa de vegeta o ou c mara decrescimentoFolhas maceradasFiltroBekerCotil donesabrasivoFolhasprim riasFolhasprim riasFolhasregularesSol ou luzSintomassist micospistilotamp oEtapas de inocula o mec nica de v rus vegetal (AGRIOS, 2005) o mec nica de v rus usando pistilo ou gazePOSTULADOSDEKOCH6 POSTULADOS DE KOCH 1. O microrganismo deve estar sempre presente nasles es das plantas doentes (ASSOCIA O CONSTANTE); 2. O microrganismo deve ser isolado e cultivado em CULTURA PURA; 3. O microrganismo isolado, deve REPRODUZIR OS SINTOMAS quando inoculado em uma planta sadia;4. O microrganismo deve ser REISOLADO da planta inoculada artificialmente e corresponder, em todas as suas caracter sticas, com o isolado das les Reisolamento da planta inoculada segundo postuladoIsolar o microrganismo da planta inoculada e compararas caracter sticas com o obtido no isolamento na aplica o do segundo postulado- Armazenamento da cultura:- novos estudos- Entidades respons veis - Dep sito e manuten o dasculturasPOSTULADOSDEKOCH