MANUEL D'AIDE A LA FORMATION EN …

1 1 Coordination R gionale d H movigilance Docteur Mahdi TAZEROUT Madame Yolande GALINIER Direction R gionale des Affaires Sanitaires et Sociales Midi-Pyr n es 10 Chemin du Raisin 31050 TOULOUSE Cedex 9 T l. Fax : MANUEL D AIDE A LA FORMATION EN TRANSFUSION SANGUINE 2 CHAPITRE 1 : LE DON DU SANG La transfusion sanguine est une discipline aux confins de l h matologie et de l immunologie : elle implique la m decine, la biologie, la bio-industrie et la sociologie ; elle repose sur l thique. La transfusion sanguine consiste administrer le sang ou l un de ses composants (globules rouges, plaquettes, granulocytes, plasma, prot ines) provenant d un ou plusieurs sujets appel s donneurs , un ou plusieurs sujets malades appel s receveurs . L laboration de produits cellulaires dits labiles, n cessaires au traitement des malades, n est possible que par la mise en uvre d une cha ne de solidarit dont le premier maillon est constitu par les donneurs de sang b n voles.

2 La mise disposition des produits doit obligatoirement r pondre des r gles de bonnes pratiques transfusionnelles : pr l vement, pr paration, qualification biologique, distribution et indications cliniques. Le respect de ces r gles est une n cessit absolue. L Etablissement Fran ais du Sang pr pare des produits sanguins labiles de qualit r pondant des normes pr cises et participe l approvisionnement en plasma au Laboratoire Fran ais du Fractionnement et des Biotechnologies (LFB) pour la production de produits stables. Le plasma permet la pr paration d albumine, de facteurs de coagulation et d immunoglobulines. I. LE PRELEVEMENT ET LA QUALIFICATION DU DON Selon la l gislation fran aise, toute personne en bonne sant , g e de 18 65 ans, peut donner son sang. Le volume maximal pr lev lors du don est de 8ml/kg. Cependant, quel que soit le poids de la personne, un volume total de 500 ml ne doit pas tre d pass , le nombre total par ann e ne doit pas exc der 5 pour les hommes et 3 pour les femmes pour les dons cellulaires et l intervalle doit tre au moins gal 8 semaines.

3 Toutefois, entre 60 et 65 ans, le nombre total par ann e chez les hommes et les femmes ne peut tre sup rieur 3 dons. La compensation des pertes subies lors d un don de sang total s effectue normalement en quelques semaines. II. LES CONTROLES A l occasion de chaque don, le donneur fait l objet : d un contr le clinique : Entretien m dical (un document de pr paration l entretien m dicale pr alable au don du sang) est remis au donneur de sang, lors de l enregistrement Examen g n ral. Il permet d liminer certaines contre-indications au don. Cette tape est d finie comme l ensemble des mesures visant r duire ou liminer les risques immunologiques ou infectieux li s la transfusion de produits sanguins (circulaire DH/DGS/3B/4 du 15 janvier 1992). 3 de contr les biologiques obligatoires : NFS d pistage syphilis d tection de l Ag HBs, anticorps anti-HBc d pistage des anticorps anti VIH1/VIH2 d pistage des anticorps anti VHC diagnostic g nomique viral : VIH/VHC d pistage des anticorps anti-HTLV1/HTLV2 groupe sanguin et ph notype rh sus Kell d pistage des h molysines Anti-A et Anti-B recherche des anticorps anti- rythrocytaires (RAE) d pistage du CMV (cytom galovirus) non obligatoire.

4 Et en cas de voyage en zone d end mie du Paludisme : s rologie anti-palud enne. III. LES PRODUITS SANGUINS LABILES Les produits sanguins labiles (PSL), issus du sang de donneurs, ne subissent aucune transformation. Toutes les tapes de pr paration des PSL visent accro tre leur puret et leur s curit . Les pr l vements et la pr paration des PSL sont r gis par des textes l gislatifs contraignants. Seul l Etablissement Fran ais du Sang est autoris les r aliser. IV. LA COMPOSITION DU SANG Le sang se compose de cellules et de plasma. Le plasma contient des prot ines diverses, dont : les immunoglobulines, l albumine, les facteurs de coagulation. Les cellules du sang se divisent en trois cat gories : les globules rouges qui transportent l oxyg ne des poumons aux tissus et captent le gaz carbonique qui est limin ensuite par les voies respiratoires ; les globules blancs qui d fendent l organisme contre les agressions des microbes, bact ries et virus ; les plaquettes qui emp chent le saignement en colmatant les l sions des vaisseaux.

5 4V. LE DON DE SANG TOTAL C est la forme de pr l vement la plus connue. Elle consiste pr lever 450 ml 500 ml de sang directement de la veine du donneur jusqu une poche de recueil qui contient l anticoagulant. La poche de recueil rassemble donc tous les l ments du sang : globules rouges, plaquettes et plasma. Pour le donneur, les pertes repr sentent : 250 280 ml de plasma, 15 20 g de prot ines 200 mg de fer 1 2 g/l d h moglobine. La compensation rythrocytaire se fait en 3 semaines (avec un pic r ticulocytaire au 9 me jour). La r cup ration vol mique est de 40 80 ml/heure. VI. LE DON DE PLASMA D APHERESE Ce don n cessite l utilisation d un s parateur. Au cours du pr l vement, le sang est s par en ses diff rents l ments. Le plasma est recueilli dans une poche, les autres l ments sont restitu s au donneur. Le pr l vement dure environ d heure. Il est possible de faire 20 dons par an avec un intervalle d au moins 2 semaines.

6 Pour le donneur, les pertes repr sentent : 600 ml de plasma, 25 40 ml de globules rouges 45 g de prot ines. La r cup ration vol mique est de 40 80 ml/heure. VII. LE DON DE PLAQUETTES D APHERESE Ce don n cessite l utilisation d un s parateur. Au cours du pr l vement, le sang est s par en ses diff rents l ments. Les plaquettes sont recueillies dans une poche, les autres l ments sont restitu s au donneur. Le pr l vement dure environ 1 heure. Il est possible de faire jusqu 5 dons par an avec un intervalle d au moins 8 semaines. Contient de 2 8 x10 11 plaquettes dans 200 650 cc de plasma Pour le donneur, les pertes repr sentent : 40 50 ml de globules rouges 20 40 % des plaquettes moins de 45 g de prot ines 10 12 % du taux initial de calcium. VIII. LE DON DE GLOBULES BLANCS D APHERESE Ce don n cessite un s parateur. Les globules blancs sont recueillis dans une poche, les autres l ments sont restitu s au donneur.

7 Ce don est tr s limit car extr mement contraignant. Il dure environ 2h30. 5IX. LE DON AUTOLOGUE Il s agit de pr lever du sang un donneur afin de transfuser ce m me donneur son propre sang. Ce don ne peut se pratiquer, g n ralement, que pour une intervention chirurgicale pr vue une date pr cise. Il faut alors d terminer la quantit de sang n cessaire. Ce pr l vement doit tre d but dans un d lai qui tient compte de la dur e de conservation des globules rouges. X. LESPRODUITS SANGUINS LABILES : A- LES CGR 1 - Issu d'un seul donneur : soit sang total ou par rythrocytaph r se 2 - Volume : . 140 cc de GR (Unit Adulte) . < 140 cc de GR (Unit Enfant) . + 80 100 cc SAGM 3 - Caract ristiques : 40 g Hb (UA) et Ht 50 - 70 % Leucocytes r siduels < 1,0 x 106 B- CONCENTRE DE PLAQUETTES ISSUES D'APHERESE (CPA) Pr lev sur 1 seul donneur par cytaph r se Contient de 2 8 x10 plaquettes dans 200 650 cc de plasma Int r t : mono donneur Diminution du risque viral Diminution des immunisations HLA Diminution des allo-immunisations ?

8 C- MELANGE DE CONCENTRES DE PLAQUETTE STANDARD (M-CPS) Obtenus par centrifugation d une unit de sang totale = CPS Contenu en plaquettes d un CPS : = 0, dans 40 60 ml de plasma Conservation entre 20 et 24 C en agitation continue La dur e de conservation est au maximum 5 jours Posologie = 1 unit par 10 Kg de poids. D- LE PLASMA FRAIS CONGEL 1- PFC s curis issu d'aph r se . S curisation 120 jours . Mono donneur . 200, 400 ou 600 ml 2- Pr paration et pr sentation du plasma frais congel viro-att nu par solvant d tergent d leucocyt (PVA-SD) Le PVA-SD est pr par en France partir d un pool de plasma de 100 donneurs maximum. Il s agit de pools de plasma d aph r se de m me groupe sanguin congel dans les 6 heures suivant le pr l vement. L inactivation des agents pathog nes est r alis e apr s cong lation-d cong lation (qui d truit les cellules) en utilisant un solvant (tri n-butyl phosphate : TnBP) et un d tergent (Triton X100).

9 L limination des inactivateurs s op re par l huile de ricin et chromatographie. Apr s filtration st rilisante, le plasma, produit acellulaire et st rile, est r parti aseptiquement en unit s de 200cc Virus 63- Pr sentation du plasma frais congel viro-att nu par bleu de m thyl ne (PVA-BM) Le plasma frais congel d leucocyt viro-att nu par bleu de m thyl ne (PVA-BM) est pr par partir d un plasma unitaire issu d aph r se puis trait l aide d une m thode autoris e par l AFSSaPS. Le plasma, pr alablement d leucocyt pour liminer les cellules r siduelles, est mis en contact avec le bleu de m thyl ne puis soumis une illumination en lumi re visible. Le BM r siduel est ensuite limin par une filtration sp cifique. Le PVA-BM est congel dans les 12 heures qui suivent la fin du pr l vement. Principe du traitement pour viro-att nuation par le bleu dem thyl ne (BM) Le BM pr sente une affinit pour les acides nucl iques.

10 Apr s absorption de l nergie lumineuse, il existe une production de formes actives d oxyg ne qui d naturent les acides nucl iques bloquant la r plication des virus. Le traitement d att nuation virale par BM permet d inactiver les virus envelopp s et certains virus non envelopp s selon les r sultats pr sent s ci-dessous. 4- PLASMA FRAIS CONGELE DELEUCOCYTE VIRO-ATTENUE PAR AMOTOSALEN Caract ristiques: Volume: 200 300 ml Pr paration: unitaire, sur un don d aph r se Cong lation 30 C ou < le plus rapidement possible et dans les 18 heures. Apr s d cong lation: Amotosalen r siduel < ou = 2 M Validit : 1 an E- LES PSL D'AUTOTRANSFUSION - CGR . Non d leucocyt en g n ral . Volume variable . Contenu en Hb variable . Conservation identique au CGR homologue . rythrocytaph r se - PFC . Dur e de conservation apr s d cong lation : 72 h . Conservation : idem CGR auto (42 jours) XI. LES MODALITES DE CONSERVATION DES PSL A.