MTU 3 Vc ISP2011 - ispch.cl

1 VibrioVibriocholeraecholeraeCaracterizac iCaracterizaci n n fenotfenot pica y molecularpica y molecularProgramaProgramade Microbiologde Microbiolog a y a y MicologMicolog aaICBMICBM--Facultad de MedicinaFacultad de MedicinaUniversidad deUniversidad deChileChileMarMar a Teresa Ulloa Flores a Teresa Ulloa Flores TM. TM. MsCsMsCs, , (c).(c).Profesor AsistenteProfesor AsistenteVibrioVibriocholeraecholeraeTax onomTaxonom aaCaracterCaracter sticas sticas fenotfenot picaspicasTaxonom a Microbiana: clasificaci n filogen ticaWoeseet al, 1990 Dominios de seres vivosEukaryaBacteriaArchaeaPhylumProteob acteriaTaxonom a Microbiana: Phylum ProteobacteriaClaseGammaProteobacteriaEs cherichia coliPseudomonas aeruginosaVibrio choleraeTaxonom a Microbiana: familiaVibrionaceaesimbiontecamaroneshum anos/pecespecespecescoralFamilia VibrionaceaeN mero especies1981: 20 spp2002: 47 spp2004: 63 spphumanoshumanoshumanoshumanoshumanosEp idemiolog a deVibrio cholerae Transmisi n: Ingesti n de comida o agua contaminada Reservorio: Agua.

2 Se sabe que persiste en ambientes acu ticos, especialmente en estuarios. Vive asociado a animales, algas y planktonEpidemiolog a deVibrio cholerae18661912 Hait . Brote epid mico. Pacientes en el CTC de MSF en el Hospital Choscal del barrio de Cit Soleil, Puerto Pr in Microbiology, 2009. Patr n estacional ( [T ]) Epidemias y pandemias (7)Epidemiolog a deVibrio choleraeCaracter sticas deVibrio cholerae Bacilo Gram negativo corto y curvo, a umde di metro , a um de largo. M til, flagelo polar cubierto por membrana externa Oxidasa positivo Halof licos (1-3%) Reduce nitratoV. choleraeCrece en la mayor a de los Medios de CultivoColonias alginolyticusV. fluvialisV. FurnisiiV. metchnikoviiColonias verde-azulesV. mimicusV. hollisaeV. parahaemolyticusV. damselaV. vulnificusMedio selectivo para el aislamiento y cultivo de vibrio sppInhibidor para la mayor a de las inhibici n se basa en las altas concentraciones de tiosulfato y citrato, la presencia de las sales biliares y un pH fuertemente n bioqun bioqu mica mica V.

3 V. stico deVibrio spp: Bater a Bioqu micaEspecieTSI LIA MIO VP Cit Arab SacV. choleraeA/A-,- K/K-,- +++ ++-+K/AV. parahaemK/A-,- K/K-,- ++(+/-) --+-V. V. choleraecholerae, caracter, caracter sticas antigsticas antig nicasnicasLipopolisac ridoV. V. choleraecholerae, caracter, caracter sticas antigsticas antig nicasnicasSerotipoSerogruposCepas O1 Ant geno OAg. BAg. CAg. B+C g. A (+)Ag. A (-)OgawaInabaHikojimaO1y O139No O1-No 0139 Lipopolisac ridoAg. OABCC aracterizaci n serol gica de V. choleraeV. cholerae: BiotipoRSSensibilidad a Fago IVRSS ensibilidad Polimixina BSRS ensibilidad a Fago V+-Voges Proskauer+-Hemaglutinaci n GR de pollo+-Hem lisis sangre de corderoEL TOR(asintom leve)CL SICO(mod severo)V. choleraeO1 Biotipo CL SICOB iotipo EL TORC aracter sticas deVibrio cholerae: biotipos y serotipos1.

4 Serogrupos: O1, O139 y [no-O1, no-O139]Phylogenetic relationship ofVibrio choleraestrainsMore than 200 serogroups (O1 O200) ofVibrio choleraeexist in aquatic environments. Only a subset of O1 and O139 serogroup strains are toxigenic (Tox+) and therefore capable of causing choleraOther strains are non-toxigenic (Tox ) and are selectedagainst. Different O antigen types are indicated by the colour of the outer membrane and sheathed flagellum(the periplasmic space and the inner membrane are not shown). Capsules are present in a subset of strains. Different strain genotypes are indicated by the colour of the cytoplasm; note thatTox+ O1 and O139 have essentially the same genotype, with the exception of the O antigen 2009 | vol7 sticassticasMoleculares y Moleculares y patogenicidadpatogenicidadCaracter sticas deVibrio cholerae: genoma12 TCChromosoma I: DNA replicaci n Divisi n celular Transcripci n genes Traduci n de prote nas Bios ntesis de pared celularChromosoma II Prote nas ribosomales Transporte de azucares, iones metalicos y aniones.

5 Metabolismo de az cares DNA reparaci nn engl j med 364;1 january 6, 2011 The integron island is a gene-capture system yetto be associated withvirulence. VPI encodes toxin-coregulated pilus and a virulenceregulator, ToxT7,8bacteriophage CTXf4 TwoVibrio choleraechromosomesEPS, a protein-secretionsystem that is required forthe export of CTX,cholera toxin and severalproteaseshlyU, which encodes a transcriptional regulatorthat controls the expressionof the haemolysinen codinggene hlyAVP2 VPI-2 Principales factores de virulencia de Enterotoxina (CT) Factor de colonizaci n (TCP) Caracter sticas deVibrio cholerae: Fagolisog nico CTXB acteriofagos Part culas virales que infectan bacterias Genoma DNA o RNA, encapsulado por prote nas Absorci n: uni n a receptores espec ficos de la pared celular Pueden establecer un ciclo l tico o lisog nico Para integrarse reconocen secuencias espec ficas en el genoma bacteriano Pueden transferir pl smidos, transposones y genes bacterianosPatogenicidad deVibrio cholerae: mecanismo de toxigenicidadSi el fago integradocambia el fenotipode la bacteria, dichofen meno se denomina: conversi nlisog nicaPatogenicidad deVibrio cholerae: mecanismo de toxigenicidadVibrio choleraeposeeun fago lisog nico en su genoma quecodifiaca para la toxina col ricaPatogenicidad deVibrio cholerae: adherencia y colonizaci n: pilus TcpA Confiere la habilidad de colonizar el intestino delgado.

6 Receptor para el fago ctx , que contiene los genes para la s ntesis de CT. La prote na estructural de la fimbria TCP est codificada en el gen tcpA, que presenta alta variabilidad Esta hipervariabilidad en la superficie de la bacteria le permite escapar del reconocimiento por el sistema inmune del hu Cholerae CT y TCPIn response to undefined stimuli during colonization, two membrane-associated transcriptional activatorcomplexes, ToxRS and TcpPH, initiate transcription of thetoxTgene. The ToxT protein is a transcriptionalactivator of the AraC family that directly activates the transcription of the genes responsible for theproduction of cholera toxin (CT) and the toxin-coregulated pilus (TCP). The TCP is a type IV bundle-forming pilus that is essential for colonization of the intestinal tract.

7 CT is an A-B type enterotoxin that isresponsible for the profuse diarrhea that is characteristic of cholera. Collectively, this regulatory systemhas been called the ToxR n de la Toxina de V. n de la Toxina de V. choleraecholeraeManifestaciones cl nicas deVibrio choleraeDosis infectante105-106 BarrerapH cidoIntestinodelgadoCiclo de vida de V. choleraeOn ingestion, vibrio choleraeuses motility andmucinases to penetrate the mucus gel andN-acetylglucosamine-binding protein A(GbpA) and other factors to colonize the smallintestine epitheliumV. choleraealters its gene expression again in order todetach from the epithelium the escape response andto prepare for transmission to another host (for example, household spread) or entry into the aquatic in theaquatic environmentby finding suitablenutrient sources suchas chitindecay into an active butnon-culturableVibrio choleraegene expression patterns at different stages of the life cycleCaracter sticas deVibrio choleraeambientales1.

8 Casos cl nicos Vc no-O1, no-O139: ChileCaracter sticas deVibrio choleraeno-O1, no-O139: isla de patogenicidadVibrioVibriocholeraecholera e Gamma Gamma ProteobacteriaProteobacteria Posee 2 cromosomasPosee 2 cromosomas ActualementeActualementese describen 200 se describen 200 serogruposserogrupos A la A la fecha,sfecha,s y 0139 son 01 y 0139 son toxigtoxig nicosnicos El cEl c lera es una infeccilera es una infecci n por n por VcVctoxigtoxig niconico TC y TCP son los principales factores de TC y TCP son los principales factores de virulencia y estvirulencia y est n n correguladoscorregulados La TGH es muy importante (presencia de La TGH es muy importante (presencia de fagos, islas e fagos, islas e integronesintegrones)) V. V. choleraecholeraepresenta diversos patrones presenta diversos patrones de de expresiexpresi n gn g nica (ambiental o nica (ambiental o Intestino del Intestino del hombre)hombre)GraciasGraciasMTUMTU